目录号：N259-YH01

产品描述:

NovoNGS® CUT&Tag High-Sensitivity Kit (for Illumina®) 是针对CUT&Tag法开发的专用试剂盒。在试剂盒的2.0版本中， CUT&Tag 2.0用高活性的pAG-Tn5融合蛋白替换了先前的pA-Tn5蛋白，转座酶所融合的pAG可以保证其对兔、鼠等多种来源的抗体具有广谱的强亲和活性，提高了CUT&Tag的特异性，并在抗体选择上具有更大的选择空间。

CUT&Tag（Cleavage Under Target & Tagmentation）是一种新兴的蛋白质-DNA互作研究方法，被用来替代传统的ChIP-Seq方法。CUT&Tag在高活性转座酶上融合了protein A/G抗体结合功能域，该功能域部分可以与靶向目的位点的抗体结合，使得Tn5转座酶在目的位点上被原位栓系，并且在目的位点附近进行打断的同时引入必要的接头序列，随后提取的DNA在经过PCR扩增后直接得到用于测序的文库。相比于被广泛应用的ChIP-Seq方法，CUT&Tag所需的细胞量更少，具有更高的信噪比和更好的可重复性。不需要进行甲醛交联固定和超声波打断，也不需要通过连接法添加测序接头，在简化操作、节省时间的同时，也提供了应用于单细胞测序研究的可能性。

试剂盒中包含了用于孵育抗体、转座体，转座体片段化的缓冲液和文库构建的整套相关试剂，并同时提供用于固定细胞的刀豆球蛋白A（ConA）磁珠。通过将细胞固定在ConA磁珠上，简化了更换反应体系和连续洗涤的操作，可以实现一管式操作。使用试剂盒提供的试剂和相应的实验流程，从细胞收集到PCR文库构建的整个实验流程可以在一天内完成。整个试剂盒中的所有酶和试剂都经过严格的质量控制和残留检测，确保了所获得文库的质量和稳定性。

产品用途：

蛋白质-DNA互作研究，在常见的哺乳动物细胞系上用于替代传统的ChIP-Seq方法，特别适用于细胞数量较少的小样本。也可应用于经过特殊处理的植物和酵母样品上。

                  图1 DNA-Target Protein-Antibody-ChiTagTM结合示意图           图2 CUT&Tag实验流程简图

产品性能和应用实例：

转座体单链接头序列：

Adaptor   1:

5’-TCGTCGGCAGCGTCAGATGTGTATAAGAGACAG-3’

Adaptor   2:

5’-GTCTCGTGGGCTCGGAGATGTGTATAAGAGACAG -3’

ME:  

5'-pCTGTCTCTTATACACATCT-3'

转座体单链接头序列：

5’-AATGATACGGCGACCACCGAGATCTACAC-Index2(i5)TCGTCGGCAGCGTCAGATGTGTATAAGAGACAG-xxxxxxxxx-CTGTCTCTTATACACATCTCCGAGCCCACGAGACIndex1(i7)-ATCTCGTATGCCGTCTTCTGCTTG-3’

For research only